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Abb. E3: Switch-II-Region von RhoA

Die drei benachbarten Aminosäuren Gln 63, Glu

64 und Asp 65 sind dargestellt. Durch den

Austausch von Glutamat 64 in RhoA gegen

Aspartat werden Transglutaminierung und

Deamidierung verhindert, obwohl sich diese

Aminosäuren nur durch ein C-Atom

unterscheiden.

Die Seitenkette des Glutamats an Position 64 in RhoA ist nur um ein C-Atom länger als die

des Aspartats, das an der entsprechenden Position (76) in Wildtyp RhoD vorkommt. Die

negative Ladung der Carboxylgruppe des Glutamats ist daher gegenüber der des Aspartats

verschoben. Es ist erstaunlich, dass dieser geringe Unterschied eine Auswirkung auf die

Transglutaminierung hat. Vorstellbar ist, dass die Verschiebung der Ladungen, zu der es beim

Austausch von Aspartat 76 in RhoD gegen Glutamat kommt, die

Transglutaminierungsreaktion begünstigt, insbesondere wegen der Nähe zu Glutamin 63 (75,

RhoD-Nummerierung).

An den Tests mit RhoD und RhoG fiel weiterhin auf, dass DNT und CNF1 an derselben Rho-

GTPase nicht immer beide Reaktionen katalysieren, sondern dass eine Reaktion,

Deamidierung oder Transglutaminierung, bevorzugt werden kann. RhoG Wildtyp wird z. B.

von CNF1 deamidiert, aber nicht transglutaminiert, während die Mutante RhoD D76E zwar

durch CNF1 transglutaminiert aber nicht deamidiert wird. Diese Ergebnisse weisen darauf

hin, dass unterschiedliche Aminosäuren der Rho-GTPasen einen Einfluss auf die Art der

Modifizierung haben können. Die Erklärung für dieses Phänomen könnte in der Bindung des

Kosubstrates liegen. Möglicherweise verhindern bestimmte Aminosäuren die Bindung des

primären Amins für die Transglutaminierung, während andere die Bindung des

Wassermoleküls für die Deamidierung erschweren.

Vergleicht man das von Lerm et al. identifizierte RhoA-Peptid (As 59-78), das für

Deamidierung und Transglutaminierung durch CNF1 ausreicht, mit dieser Region in RhoD

D76E, das nur transglutaminiert wird, so fallen die Aminosäuren 73, 77 und 78 als

abweichend auf. Möglicherweise haben sie einen entscheidenden Einfluss auf die

Deamidierungsreaktion (Abb. E4).

Gln 63

Glu 64

Asp 65

Gln 63

Glu 64

Asp 65

1 2 ... 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 ... 93 94

Brak uwag

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