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Gewebstransglutaminase. In diesem Sinne lassen sich die Ergebnisse dieser Arbeit

interpretieren. Obwohl die Region in RhoA, die der Konsensus-Sequenz entspricht,

a/jointfilesconvert/377385/bgeändert wurde, findet eine Transglutaminierung statt. Darin zeigt sich die Flexibilität der

Gewebstransglutaminase in ihrer Substratspezifität.

Eher unwahrscheinlich erscheint die Möglichkeit, dass Glutamin 136 durch die Mutationen

tatsächlich nicht mehr transglutaminiert wird und dies aufgrund der Transglutaminierung von

Glutamin 63 nicht erkennbar ist. Da Glutamin 136 in RhoA sehr stark transglutaminiert wird,

wäre zumindest eine Verringerung der Fluoreszenz zu erwarten, wenn dort keine

Modifizierung mehr statt fände.

Daher bleiben trotzdem die Fragen, warum Cdc42 nicht transglutaminiert wird, obwohl die

Gewebstransglutaminase ansonsten so unspezifisch ist, und welche Aminosäuren die

Transglutaminierung verhindern. Eine Ursache dafür, dass die RhoA-Mutanten weiterhin

transglutaminiert werden, könnte darin liegen, dass sich Cdc42 in der untersuchten Region

gleichzeitig in drei Aminosäuren von RhoA unterscheidet. In dieser Arbeit wurde aber jeweils

nur eine Aminosäure ausgetauscht.

III Ausblick

Die wichtigste Frage, die sich aus den vorliegenden Ergebnissen ergibt, ist die nach den

Aminosäuren in einer Rho-GTPase, die eine Transglutaminierung bzw. eine Deamidierung

ermöglichen. Bisher sind als Faktoren, die sich darauf auswirken, ob eine

Transglutaminierung oder eine Deamidierung stattfindet, das Toxin und das Kosubstrat

(Schmidt, 1998) bekannt. Im aktiven Zentrum von DNT gibt es negative Ladungen, die in

CNF1 nicht vorkommen (Buetow 2001), und die wahrscheinlich die Bindung des

Kosubstrates für die Transglutaminierung begünstigen. Es wäre interessant, genauer zu

untersuchen, wie sich die Aminosäuresequenz des Substrates darauf auswirkt, ob eine

Deamidierung oder eine Transglutaminierung katalysiert wird.

Des Weiteren lässt sich ausgehend von den Ergebnissen der Unterschied zwischen RhoG und

RhoD genauer charakterisieren. Der Austausch weiterer Aminosäuren in RhoG kann mehr

Aufschluss über Strukturen der Rho-GTPasen geben, die für die Substraterkennung durch

CNF1 und DNT notwendig sind.

Das Ergebnis, dass RhoD durch den Austausch von Aspartat 64 (76, RhoD-Nummerierung)

zum Substrat von DNT und CNF1 wird, könnte Anlass zur weiteren Erforschung der

Substratspezifität bakterieller Toxine geben. RhoD D76E könnte daraufhin getestet werden,

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